Réponse immunitaire de l’hôte à la méningite tuberculeuse

Cette étude améliore notre compréhension de la pathogenèse de la tuberculose TBM et peut orienter les stratégies futures pour la prévention de l’immunopathologie associée à TBM Nos données suggèrent que les signatures de biomarqueurs de l’hôte dans le liquide céphalo-rachidien ont des applications diagnostiques prometteuses et nécessitent une enquête urgente

Contexte La tuberculose est une complication grave de la tuberculose qui affecte principalement les jeunes enfants Le traitement précoce est essentiel pour prévenir la morbidité et la mortalité, soulignant l’importance du diagnostic précoce Le manque de méthodes sensibles pour un diagnostic précoce est la cause la plus fréquente de retard. développer des tests simplifiés pour la tuberculose, mais leur pouvoir diagnostique reste faible Le tableau clinique de la TBM est principalement déterminé par la réponse immunitaire de l’hôte à Mycobacterium tuberculosis; Méthodologies Nous avons étudié les biomarqueurs spécifiques des TBM infantiles chez une cohorte d’enfants âgés de plusieurs mois avec des symptômes et des signes évocateurs d’une méningite. Le liquide céphalo-rachidien et le LCR ont été étudiés. Les analyses de classification hiérarchique non supervisée ont révélé un profil spécifique de biomarqueurs pour TBM par rapport à d’autres types de méningite. Un modèle de prédiction diagnostique basé sur les biomarqueurs pour la TBM infantile basé sur les concentrations de CSF de l’interleukine cutoff valeur, pg / mL, valeur de coupure du facteur de croissance de l’endothélium vasculaire, pg / mL, et seuil de LL-cathélicidine, pg / mL est présenté avec une sensibilité et une spécificité des conclusions. Ces données soulignent le potentiel des biosignatures dans le LCR de l’hôte. applications diagnostiques et pour améliorer r compréhension de la pathogenèse du TBM pour découvrir des stratégies pour prévenir les séquelles immunopathologiques

méningite tuberculeuse, réponse immunitaire de l’hôte, biomarqueurUn tiers de la population mondiale est actuellement infecté par Mycobacterium tuberculosis, et chaque année & gt; millions de personnes meurent de la tuberculose Système nerveux central L’atteinte du système nerveux central touche environ% de tous les cas de tuberculose, parmi lesquels les cas de méningite tuberculeuse sont les plus graves, fréquents durant la petite enfance La transmission hématogène des bacilles pulmonaires primitifs le foyer peut mener au développement d’un granulome caséeux – appelé un foyer riche – dans les méninges, le tissu cérébral adjacent, ou l’épendyma ventriculaire Rupture d’un foyer riche dans l’espace subarachnoid provoque les dispositifs cliniques de TBM Dans la plupart des cas, TBM se développe dans un Quelques mois après l’infection primaire Le résultat du TBM est souvent médiocre malgré un traitement antituberculeux adéquat L’initiation précoce du traitement est le facteur le plus important affectant la morbidité, la mortalité et les coûts de santé, soulignant l’importance du diagnostic précoce. les mécanismes cellulaires et moléculaires qui sous-tendent sa physiopathologie sont mal compris La réponse à un pathogène envahissant nécessite une coordination précise des composants du système immunitaire De nombreux signes, symptômes et séquelles de la TBM résultent d’une réponse inflammatoire immunologiquement dirigée contre l’infection Les altérations du taux de cytokine chez les patients affectent la fonction du système immunitaire et influencent directement l’évolution de la TBM En particulier, l’équilibre entre cytokines pro- et anti-inflammatoires peut jouer un rôle important dans la progression de la maladie Plusieurs cytokines pro- et anti-inflammatoires, par exemple, facteur de nécrose tumorale Le [TNF] α, l’interféron [IFN] γ, l’interleukine [IL] β, l’IL-, l’IL- et l’IL- sont régulés positivement dans le LCR du liquide céphalorachidien des patients atteints de TBM par rapport à d’autres types de méningite [, -] réponse inflammatoire spécifique de l’hôte à TBM a été suggéré, mais n’a pas été étudiée en profondeur Utilisation de techniques statistiques émergentes, telles que l’analyse UHC clustering hiérarchique non supervisé, l’analyse en composantes principales PCA , et l’analyse des voies, nous avons étudié le profil d’expression des biomarqueurs spécifiques à la maladie du TBM chez l’enfant Nous avons également évalué la valeur des modèles de prédiction diagnostique basés sur les biomarqueurs pour le TBM

Méthodes

Population étudiée et définition de cas

Nous avons mené une étude de cohorte prospective en milieu hospitalier sur des enfants âgés de plusieurs mois, avec des symptômes évocateurs de méningite, admis à l’hôpital Tygerberg, Cape Town, Afrique du Sud, entre novembre et novembre. Les symptômes et les signes de méningite inclus ou plus suivant: céphalées, irritabilité, vomissements, fièvre, raideur de la nuque, convulsions, déficits neurologiques focaux, altération de la conscience et léthargie. Tous les enfants suspects de méningite ont été classés dans le groupe TBM ou non TBM selon les critères diagnostiques proposés par Marais et al.

Évaluation microbiologique du liquide céphalorachidien

Chez les patients suspectés de TBM, nous avons réalisé une coloration à l’auramine pour la microscopie à fluorescence directe, Bacton Dickinson et la culture de systèmes de diagnostic de la société, et des tests d’amplification d’acides nucléiques commerciaux: le GenoType MTBDRplus Hain Life Science GmbH et Xpert MTB / RIF Céphéide Tous les tests ont été effectués selon les directives du fabricant. Coloration de Gram, coloration à l’encre de Chine et hémocultures dans tous les cas dans le cadre des soins de routine Réaction PCR en chaîne pour les virus, y compris un virus herpétique, un entérovirus et des oreillons. virus, a été réalisée lorsque la méningite virale VM était suspectée

Groupe TBM

TBM a été classé comme «définitif» lorsque des bacilles acido-résistants étaient présents dans, M tuberculosis a été cultivé ou M tuberculosis a été détecté par les TAAN commerciaux dans le LCR d’un patient présentant des symptômes ou des signes évocateurs de la TBM. «Probable» lorsque les patients avaient un score diagnostique ≥ lorsque l’imagerie cérébrale était disponible et ≥ lorsque l’imagerie n’était pas disponible TBM a été classé comme «possible» lorsqu’un patient avait un score diagnostique de – lorsque l’imagerie cérébrale était disponible et – lorsque l’imagerie était indisponible étaient basés sur la définition de cas clinique uniforme de Marais et al

Groupe non-TBM

Le groupe non-TBM inclus méningite bactérienne BM, VM, et aucune méningite NoM BM a été identifié quand un pathogène bactérien a été confirmé par microscopie et / ou culture ou l’examen CSF a montré au moins des suivants: apparence trouble, leucocytose de & gt; cellules / μL dans l’isolement, ou leucocytose – cellules / μL et soit protéine élevée & gt; g / L ou glucose du LCR <% de glucose sérique VM a été diagnostiqué lorsqu'un virus pathogène a été confirmé par PCR ou que le résultat clinique était favorable avec seulement un traitement de soutien et / ou antiviral et une numération leucocytaire du LCR ≥ autres causes de méningite ont été exclues Quand une autre cause a été identifiée qui a expliqué la présentation clinique ainsi qu'un nombre de leucocytes dans le LCR & lt; × / L, un diagnostic de «pas de méningite» a été fait

La préparation des échantillons

Tous les échantillons de sérum et de liquide céphalorachidien ont été centrifugés et le surnageant a été prélevé dans des microtubes de polypropylène stériles et stockés à-° C jusqu’à utilisation du surnageant de CSF à travers un Durapore hydrophile. Membrane filtrante en polyvinylidène difluorure Plaque MultiScreenHTS-GV μm; EMD Millipore Corporation

Analyse de cytokine multiplex et chimiokine

Un panel de biomarqueurs de l’hôte dans des échantillons de sérum et de LCR a été mesuré par la technologie de réseau de billes multiplex Luminex Bio-Rad Laboratories Le panel incluait IL-β, antagoniste des récepteurs IL-IL, IL-, IL- à IL-, IL- p , IL-, IL-, IL-, IFN-γ, TNF-α, protéine inflammatoire des macrophages MIP α, MIP-β, facteur stimulant les colonies de granulocytes, facteur stimulant les colonies de granulocytes macrophages, éotaxine, facteur de croissance des fibroblastes basiques bFGF, monocytes Protéine chimiotactique, régulée lors de l’activation de RANTES exprimée et sécrétée par les lymphocytes T normaux, protéine IP induite par l’IFN-γ, facteur de croissance plaquettaire BB et facteur de croissance vasculaire endothélial VEGF Avant l’analyse, les échantillons de sérum étaient dilués: avec le diluant le kit tel que recommandé par le fabricant Les tests ont été lus sur la plateforme Bio-Plex et le logiciel Bio-Plex Manager a été utilisé pour l’acquisition et l’analyse des billes.

Cathélicidine LL-

USCN Life Science Le protocole du fabricant a été suivi et les échantillons de sérum ont été dilués: avec du sérum physiologique tamponné au phosphate Initialement, le coefficient de variation intra-dosage CV a été évalué à l’aide d’un kit de dosage immuno-enzymatique. pour la cathélicidine, les mesures de LL étaient élevées, mais après l’introduction de lavages supplémentaires, le CV intra-essai était <%

Analyses statistiques

Les analyses statistiques ont été effectuées en utilisant la version du logiciel SPSS, la version GraphPad Prism et la version R Les tables de contingence ont été analysées en utilisant les exact ou les tests exacts de Fisher. Les comparaisons par paire de données non paramétriques ont été réalisées en utilisant le test de Kruskal-Wallis. L’analyse UHC des biomarqueurs dans le LCR et le sérum, la génération de cartes thermiques et l’ACP ont été réalisées en utilisant le logiciel Qlucore Omics Explorer. Une analyse de la courbe spline cubique restreinte a été effectuée pour évaluer la linéarité des facteurs. Aucun des biomarqueurs sélectionnés n’ayant montré de linéarité et la taille de l’échantillon étant limitée, les variables ont été dichotomisées thrombus. en utilisant la valeur maximale de l’indice Youden Spécificité de sensibilité – comme seuil La sélection descendante pas à pas basée sur le test de Wald avec P = comme seuil a été utilisée pour sélectionner les variables Toutes les combinaisons possibles des prédicteurs individuels ont été évaluées La qualité de l’ajustement du modèle a été testée avec le Hosmer-Lemeshow La courbe ROC basée sur les probabilités prédites du modèle a été calculée. La surface sous la courbe AUC, la sensibilité, la spécificité et les valeurs prédictives positives et négatives ont été calculées. Les techniques bootstrap ont été utilisées pour la validation interne des modèles de prédiction. dupliquer, et la moyenne calculée des mesures a été utilisée dans les analyses. Le personnel du laboratoire a été aveuglé par les informations cliniques associées aux échantillons. Dans toutes les analyses, P & lt; a été considéré comme statistiquement significatif, sauf indication contraire

Approbation éthique

L’étude a été approuvée par le comité d’éthique de recherche humaine de l’université de Stellenbosch numéro d’étude N // Le consentement éclairé écrit a été obtenu de tous les patients ou de leurs soignants

RÉSULTATS

Les caractéristiques de base

Léthargie – Rigidité du cou – Conscience altérée – Durée du symptôme & gt; d – & lt; Sauf indication contraire, n = Abréviations: IMC, indice de masse corporelle; CI, intervalle de confiance; VIH, virus de l’immunodéficience humaine; OU, odds ratio; SD, écart-type; TBM, méningite tuberculeuse L’écart-type des valeurs de l’indice de masse corporelle était basé sur les Normes de croissance de l’Organisation mondiale de la Santé b En raison du nombre limité de patients blancs, ces patients ont été exclus de l’analyse. symptôme observé dans la plupart des casTableau des caractéristiques des patients atteints de méningite tuberculeuseCaractéristique Non% Total Aucune histoire Durée des symptômes & gt; d Symptômes évocateurs de la tuberculose Contact avec la tuberculose dans l’histoireb n = Signes cliniques TBM stagec n = I IIa IIb III Déficit neurologique focal excluant la paralysie du nerf crânien Paralysie du nerf crânien LCF Aspect clair Leucocytes – cellules / μL n = Lymphocytes>% Concentrations protéiques & gt; g / L n = Glucose & lt; mmol / L n = Imagerie cérébrale Hydrocéphalie n = Amélioration méningée basale n = Tuberculome n = Infarctus n = Hyperdensité basale précontrainte n = Caractéristique Non% Total Non Historique Durée des symptômes & gt; d Symptômes évocateurs de la tuberculose Contact avec la tuberculose dans l’histoireb n = Signes cliniques TBM stagec n = I IIa IIb III Déficit neurologique focal excluant la paralysie du nerf crânien Paralysie du nerf crânien LCF Aspect clair Leucocytes – cellules / μL n = Lymphocytes>% Concentrations protéiques & gt; g / L n = Glucose & lt; mmol / L n = Imagerie cérébrale Hydrocéphalie n = Amélioration méningée basale n = Tuberculome n = Infarctus n = Hyperdensité basale précontrainte n = Sauf indication contraire, n = Abréviations: LCR, liquide céphalo-rachidien; TBM, méningite tuberculeuse Symptômes systémiques suggérant une tuberculose ≥ perte de poids / gain de poids médiocre chez les enfants, sueurs nocturnes ou toux persistante & gt; semainesb Antécédents de contact étroit récent avec une personne atteinte de tuberculose pulmonaire ou d’un test cutané tuberculinique positif / test de libération d’interféron-y chez un enfant âgé de moins de 18 ans. yearsc Stade TBM raffiné de van Toorn et al Figure Agrandir l’image Diapositive de téléchargementFlucture des participants de l’étude aClinical case definition of Marais et al ; bOf les patients sans méningite, des échantillons de patients ont été sélectionnés pour l’analyse Des échantillons avec le plus grand volume de liquide céphalo-rachidien et de sérum disponible ont été utilisés Abréviations: CSF, liquide céphalo-rachidien; TBM, méningite tuberculeuseFigure View largeTélécharger la diapositive Diagramme de flux des participants à l’étude aClinical case definition of Marais et al ; bOf les patients sans méningite, des échantillons de patients ont été sélectionnés pour l’analyse Des échantillons avec le plus grand volume de liquide céphalo-rachidien et de sérum disponible ont été utilisés Abréviations: CSF, liquide céphalo-rachidien; TBM, méningite tuberculeuseFigure Voir grandTélécharger DiapositiveVerrirTélécharger le liquideCérébrospinal CSF et taux d’expression des biomarqueurs sériques chez les patients avec et sans méningite tuberculeuse TBM A, échantillons CSF B, échantillons de sérum Les résultats sont exprimés en picogrammes par millilitre Les cercles noirs correspondent aux patients TBM TBM; n =; cercles vides – correspondent à des patients non TBM n = Les lignes pointillées représentent la limite moyenne de détection pour les cytokines groupées Des comparaisons statistiques ont été effectuées en utilisant le test de Mann-Whitney * P & lt; et P ≥; ** P & lt; Abréviations: FGF, facteur de croissance des fibroblastes; G-CSF, facteur stimulant les colonies de granulocytes; GM-CSF, facteur de stimulation des colonies de macrophages granulocytaires; IFN, interféron; IL, interleukine; IP, protéine induite par IFN-y; LL, cathélicidine; MCP, protéine chimiotactique monocytaire; MIP, protéine inflammatoire des macrophages; PDGF, facteur de croissance dérivé des plaquettes BB; RANTES, régulé lors de l’activation des lymphocytes T normaux exprimés et sécrétés; TNF, facteur de nécrose tumorale; VEGF, facteur de croissance endothélial vasculaireFigure View largeTélécharger DiapositiveView largeTélécharger le liquideCrebrospinal CSF et taux d’expression des biomarqueurs sériques chez les patients avec et sans méningite tuberculeuse TBM A, échantillons CSF B, échantillons de sérum Les résultats sont exprimés en picogrammes par millilitre Les cercles noirs correspondent aux patients TBM TBM ; n =; cercles vides – correspondent à des patients non TBM n = Les lignes pointillées représentent la limite moyenne de détection pour les cytokines groupées Des comparaisons statistiques ont été effectuées en utilisant le test de Mann-Whitney * P & lt; et P ≥; ** P & lt; Abréviations: FGF, facteur de croissance des fibroblastes; G-CSF, facteur stimulant les colonies de granulocytes; GM-CSF, facteur de stimulation des colonies de macrophages granulocytaires; IFN, interféron; IL, interleukine; IP, protéine induite par IFN-y; LL, cathélicidine; MCP, protéine chimiotactique monocytaire; MIP, protéine inflammatoire des macrophages; PDGF, facteur de croissance dérivé des plaquettes BB; RANTES, régulé lors de l’activation des lymphocytes T normaux exprimés et sécrétés; TNF, facteur de nécrose tumorale; VEGF, facteur de croissance de l’endothélium vasculaire

Analyse de sous-groupe Le test de Kruskal-Wallis du groupe TBM n’a montré aucune différence significative dans l’expression des biomarqueurs dans le LCR et le sérum entre TBM définitifs, probables et possibles Huit TBM a reçu un traitement antimicrobien incluant des corticostéroïdes adjuvants avant la ponction lombaire Aucune différence significative n’a été trouvée dans l’expression de biomarqueurs dans le LCR ou le sérum entre ces patients et ceux qui n’ont pas reçu de traitement antimicrobien avant la ponction lombaire

Clustering hiérarchique non supervisé et PCA

et sans n = TBM Les valeurs normalisées pour chaque biomarqueur sont représentées selon l’échelle de couleur, où le rouge et le vert représentent respectivement l’expression au-dessus et au-dessous de la médiane. Le dendrogramme ci-dessus montre la proximité entre les différents patients. jaune = non-TBM, suggérant que les patients de chaque sous-groupe partagent probablement la même origine B, Représentation tridimensionnelle de l’analyse en composantes principales des patients avec et sans TBM Chaque point représente un participant sur la base des valeurs de tous Les biomarqueurs étudiés Le pourcentage de variance est représenté sur les axes La distance dans l’espace entre chaque point représente la parenté entre chaque individu Visualisation des cas de TBM est observée Abréviations: FGF, facteur de croissance des fibroblastes; GCSF, facteur stimulant les colonies de granulocytes; GMCSF, facteur de stimulation des colonies de macrophages granulocytaires; IFN, interféron; IL, interleukine; IP, protéine induite par IFN-y; MCAF, facteur chimiotactique et activateur des monocytes; MCP, protéine chimiotactique monocytaire; MIP, protéine inflammatoire des macrophages; PDGF, facteur de croissance dérivé des plaquettes BB; RANTES, régulé lors de l’activation des lymphocytes T normaux exprimés et sécrétés; TNF, facteur de nécrose tumorale; VEGF, facteur de croissance endothélial vasculaireFigure View largeTélécharger Diagramme Cluster hiérarchique non supervisé et analyse en composantes principales des biomarqueurs dans le liquide céphalorachidien FSC des patients avec et sans méningite tuberculeuse TBM A, Cluster hiérarchique bidirectionnel non supervisé des profils de biomarqueurs dans le LCR des patients avec n = et sans n = TBM Les valeurs normalisées pour chaque biomarqueur sont représentées selon l’échelle de couleur, où le rouge et le vert représentent respectivement l’expression au-dessus et au-dessous de la médiane. Le dendrogramme ci-dessus montre la proximité entre les différents patients. jaune = non-TBM, suggérant que les patients de chaque sous-groupe partagent probablement la même origine B, Représentation tridimensionnelle de l’analyse en composantes principales des patients avec et sans TBM Chaque point représente un participant sur la base des valeurs de tous Les biomarqueurs étudiés Le pourcentage de variance est représenté sur les axes La distance dans l’espace entre chaque point représente la parenté entre chaque individu Visualisation des cas de TBM est observée Abréviations: FGF, facteur de croissance des fibroblastes; GCSF, facteur stimulant les colonies de granulocytes; GMCSF, facteur de stimulation des colonies de macrophages granulocytaires; IFN, interféron; IL, interleukine; IP, protéine induite par IFN-y; MCAF, facteur chimiotactique et activateur des monocytes; MCP, protéine chimiotactique monocytaire; MIP, protéine inflammatoire des macrophages; PDGF, facteur de croissance dérivé des plaquettes BB; RANTES, régulé lors de l’activation des lymphocytes T normaux exprimés et sécrétés; TNF, facteur de nécrose tumorale; VEGF, facteur de croissance endothélial vasculaireFigure View largeTélécharger slideBiomarker profils d’expression dans le liquide céphalorachidien CSF de patients avec et dans des sous-groupes de patients sans méningite tuberculeuse TBM analyse hiérarchique non supervisée des profils d’expression de biomarqueurs dans le CSF des patients avec n = et sous-groupes de patients sans bactéries groupe BM de la méningite [n =]; le groupe VM de la méningite virale [n =]; aucune méningite Groupe NoM [n =] TBM Les médianes groupées par sous-groupe ont été prises pour illustrer les différences dans les profils d’expression des biomarqueurs entre les groupes. Abréviations: FGF, facteur de croissance des fibroblastes; GCSF, facteur stimulant les colonies de granulocytes; GMCSF, facteur de stimulation des colonies de macrophages granulocytaires; IFN, interféron; IL, interleukine; IP, protéine induite par IFN-y; MCAF, facteur chimiotactique et activateur des monocytes; MCP, protéine chimiotactique monocytaire; MIP, protéine inflammatoire des macrophages; PDGF, facteur de croissance dérivé des plaquettes BB; RANTES, régulé lors de l’activation des lymphocytes T normaux exprimés et sécrétés; TNF, facteur de nécrose tumorale; VEGF, facteur de croissance endothélial vasculaireFigure View largeTélécharger slideBiomarker profils d’expression dans le liquide céphalorachidien CSF de patients avec et dans des sous-groupes de patients sans méningite tuberculeuse TBM analyse hiérarchique non supervisée des profils d’expression de biomarqueurs dans le CSF des patients avec n = et sous-groupes de patients sans bactéries groupe BM de la méningite [n =]; le groupe VM de la méningite virale [n =]; aucune méningite Groupe NoM [n =] TBM Les médianes groupées par sous-groupe ont été prises pour illustrer les différences dans les profils d’expression des biomarqueurs entre les groupes. Abréviations: FGF, facteur de croissance des fibroblastes; GCSF, facteur stimulant les colonies de granulocytes; GMCSF, facteur de stimulation des colonies de macrophages granulocytaires; IFN, interféron; IL, interleukine; IP, protéine induite par IFN-y; MCAF, facteur chimiotactique et activateur des monocytes; MCP, protéine chimiotactique monocytaire; MIP, protéine inflammatoire des macrophages; PDGF, facteur de croissance dérivé des plaquettes BB; RANTES, régulé lors de l’activation des lymphocytes T normaux exprimés et sécrétés; TNF, facteur de nécrose tumorale; VEGF, facteur de croissance de l’endothélium vasculaire

Analyse de chemin d’ingéniosité

Pour comprendre la pertinence biologique des biomarqueurs différentiellement exprimés dans le LCR des patients TBM, BM et VM, nous avons effectué des analyses de voie d’ingéniosité. Les voies associées à la signalisation IL, l’hypercytokinémie et la communication entre les cellules immunitaires étaient pertinentes pour tous les types de méningite. , l’abondance relative des marqueurs liés aux voies pathogènes associés à la sclérose en plaques, l’activation du RXR du récepteur VDR / rétinoïde X et la signalisation CCR du récepteur des chimiokines CC chez les macrophages étaient plus marquées chez les TBM que chez les BM ou VM. associés à la SEP ont été régulés positivement dans le LCR des patients avec TBM MIP-α, MIP-β, RANTES et IP-; cependant, chez les patients atteints de BM, seuls RANTES, et chez les patients avec VM, seulement MIP-β, étaient régulés positivement De même, l’abondance relative des cytokines impliquées dans la voie VDR était plus grande chez les patients TBM cathélicidine LL-, RANTES, IP-, et IFN-γ par rapport aux patients avec BM RANTES et IL- et VM granulocyte stimulant colonie, IFN-γ, et IL-Trois marqueurs chez les patients avec TBM MIP-α, MIP-β, et RANTES ont été associés à la signalisation CCR dans macrophages, alors que seule une partie de ces molécules était présente en abondance relativement élevée chez les patients atteints de BM RANTES et de VM MIP-β. Cette analyse suggère que des voies de signalisation distinctes sont activées dans le TBM, BM et VM; cependant, une certaine discrétion pour tirer des conclusions de cette analyse est nécessaire puisque le groupe BM est relativement petit en nombre n =

Modèle de diagnostic pour TBM

Une signature de biomarqueur TBM-spécifique a été trouvée dans les échantillons de CSF par UHC, PCA, et l’analyse de la voie; par conséquent, nous avons évalué un modèle de diagnostic biomarqueur pour les biomarqueurs TBM CSF avec des différences significatives dans l’expression entre TBM et les autres sous-types de méningite VM et BM ont été utilisés pour cette analyse Données supplémentaires Le modèle de diagnostic final consistait en une combinaison de biomarqueurs: IL-, VEGF, et la cathélicidine LL- Une courbe ROC basée sur la probabilité prédite du modèle a été calculée, avec une AUC de% CI, – Après validation interne, l’AUC était et le coefficient de régression a été ajusté par un facteur de correction du modèle final. La sensibilité, la spécificité, la valeur prédictive positive, et la valeur prédictive négative des biomarqueurs, à la fois individuellement et en combinaison, sont décrites dans le tableau L’association des biomarqueurs utilisés dans le modèle de diagnostic avec les caractéristiques cliniques des patients TBM Tableau a été évalué avec des tests non paramétriques Les concentrations de VEGF dans le LCR étaient significativement plus élevées chez les patients avec LCR concentration de protéines & gt; g / L P =, l’hydrocéphalie P =, l’amélioration basale méningée P =, et l’hyperdensité basale avant le traitement P = les taux d’IL ont été significativement plus élevés P = chez les patients atteints de LCR glucose & lt; mmol / L Tableau Modèles diagnostiques à base de biomarqueurs pour la méningite tuberculeuse Spécificité de la sensibilité B du VEGF LL-IL-VEGF et LL-VEGF et IL-IL- et LL- IL- et LL- et VEGF Biomarqueur B positif Spécificité PPV NPV VEGF LL-IL-VEGF et LL-VEGF et IL-IL- et LL- IL- et LL- et VEGF Les coefficients de régression B ont été ajustés par un facteur de correction résultant de l’interception corrigée des valeurs – Cutoff basées sur indice de Youden maximum J = spécificité de sensibilité -: VEGF, pg / mL; cathélicidine LL-, pg / ml; IL-, pg / mLAbbreviations: IL, interleukine; LL, cathélicidine; NPV, valeur prédictive négative; PPV, valeur prédictive positive; VEGF, facteur de croissance de l’endothélium vasculaire

DISCUSSION

mokines impliquées dans les voies liées à la pathogenèse de la SEP, y compris la signalisation CCR dans les macrophages et l’activation VDR / RCR étaient plus élevés que dans le LCR des patients atteints de BM ou VM MS est une maladie démyélinisante chronique du SNC avec plusieurs mécanismes pathogènes La libération de cytokines pro-inflammatoires par les lymphocytes T auxiliaires et les macrophages déclenche une chaîne d’événements, entraînant la formation de plaques démyélinisées et de lésions axonales Un réseau de chimiokines et de récepteurs de chimiokines , y compris MIP-α, MIP-β, RANTES, IP- et CCR, peuvent influencer le trafic des cellules immunitaires et leur transfert vers les sites de lésion, et est une cible potentielle pour le traitement de la SEP La régulation positive de la SEP signalisation dans la TBM suggère que des modalités de traitement similaires pourraient affecter les séquelles de la TBMLa forme active de la vitamine D, la dihydroxyvitamine D, a des fonctions physiologiques Au-delà de son rôle classique dans l’homéostasie calcique et le métabolisme osseux, la carence en vitamine D est associée à des maladies inflammatoires et à de longues périodes de latence, comme la SEP, la polyarthrite rhumatoïde, le diabète et la tuberculose L’implication des composants des voies VDR / RXR rôle potentiel de la vitamine D dans la pathogenèse de la TBM et rappelle les maladies auto-immunes telles que le MST. Le standard de référence actuel pour le diagnostic du TBM est la visualisation des bacilles acido-alcoolo-résistants dans la culture mycobactérienne du LCR. de nombreuses tentatives ont été faites pour mettre au point des tests de détection de l’antigène simplifiés, principalement des antigènes, mais leur pouvoir diagnostique reste faible Récemment, un groupe multidisciplinaire d’experts de la tuberculose a proposé les critères essentiels d’un test sur le lieu de soins Pour la tuberculose extrapulmonaire, le test devrait fournir De ce point de vue, le modèle de diagnostic présenté ici, sensibilité%, spécificité%, bien qu’approchant de cette performance, ne constitue pas un critère de diagnostic au point de service pour le TBM. comparé à la norme actuelle des tests diagnostiques pour TBM infantile, qui ont une sensibilité encore plus faible, un raffinement supplémentaire de ce modèle semble important Misra et al ont trouvé des infarctus associés à une augmentation relative des concentrations de VEGF dans le LCR des patients atteints de TBM. n’a pas trouvé cette association mais a trouvé des associations claires avec la concentration en protéines du LCR & gt; g / L, hydrocéphalie, renforcement basal méningé et hyperdensité basale précontrastée Le VEGF est un inducteur puissant de la perméabilité vasculaire et de l’angiogenèse et est impliqué dans la pathogenèse de l’œdème cérébral lié à l’ischémie, au traumatisme, aux tumeurs et aux infections rapportent des niveaux élevés de VEGF dans le LCR , suggérant que cela pourrait contribuer à la perturbation de la barrière hémato-encéphalique et à la formation d’œdème cérébral dans la TBMOur a certaines limites. Premièrement, seuls les marqueurs hôtes ont été évalués dans cette étude. sont évaluables avec des réseaux de cytokines multiplexes et devraient être inclus dans de futures études Bien que la validation interne dans la même cohorte de patients soit nécessaire et utile, la capacité de généraliser le modèle de prédiction dans un groupe indépendant de patients est nécessaire. population indépendante et comparable à un autre endroit devrait être réalisée avant la mise en Dans le cadre clinique Deuxièmement, une définition de cas basée sur un consensus d’experts a été utilisée pour le diagnostic TBM et aurait pu causer un biais de classification erronée. Il est intéressant de noter que l’analyse sous-groupe des patients TBM n’a révélé aucune différence immunologique entre TBM définitif, probable et possible. Les patients TBM ont reçu un traitement antimicrobien incluant des corticostéroïdes d’appoint avant la ponction lombaire. Ces dernières années, les corticostéroïdes ont été utilisés comme adjuvants aux médicaments antituberculeux pour améliorer les résultats chez les personnes immunodéprimées par l’immunodéficience humaine , mais les mécanismes exacts sont encore incomplètement compris. al a étudié la cinétique de la réponse inflammatoire dans le liquide céphalorachidien et le sang périphérique des adultes atteints de TBM et n’a trouvé qu’une modulation significative des concentrations aiguës de protéines dans le LCR et des concentrations d’IFN-y marginalement réduites. résultats prés En conclusion, cette étude améliore notre compréhension de la pathogenèse du TBM et pourrait orienter les futures stratégies de prévention de l’immunopathologie associée à cette maladie dévastatrice. Nos données suggèrent que les signatures de biomarqueurs de l’hôte dans le LCR ont des applications diagnostiques prometteuses et nécessitent une investigation urgente.

Remarques

Remerciements Nous remercions B Kriel pour son assistance technique lors des tests de cathélicidine LL-enzyme-linked immunosorbent, C Claassen et AJ Salie pour leur aide dans la collecte d’échantillons, et SL van Elsland comme chef de projet du groupe d’étude sur la méningite tuberculeuse. : Aucun conflit signalé Tous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits d’intérêts potentiels Conflits que les éditeurs considèrent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués