Culture d’échantillons de biopsie osseuse percutanée pour le diagnostic de l’ostéomyélite diabétique des pieds: concordance avec les cultures d’écouvillonnage des ulcères

Contexte Nous avons évalué la valeur diagnostique des cultures sur écouvillon en les comparant aux cultures correspondantes de spécimens de biopsie osseuse percutanée chez des patients atteints d’ostéomyélite diabétique des piedsMéthodes Les tableaux médicaux des patients atteints d’ostéomyélite du pied ont subi une biopsie osseuse percutanée chirurgicale entre janvier et juin sur un seul pied diabétique Soixante-seize patients avec des épisodes d’ostéomyélite du pied qui ont eu des résultats positifs de culture de spécimens de biopsie osseuse et qui n’avaient reçu aucun traitement antibiotique depuis au moins plusieurs semaines avant la biopsie représentaient la population étudiée. Les pathogènes isolés des échantillons osseux étaient principalement des staphylocoques% et gram Les distributions de microorganismes dans les cultures d’os et d’écouvillons étaient similaires, à l’exception des staphylocoques à coagulase négative, qui étaient plus fréquents dans les échantillons d’os P & lt; Les résultats des cultures de prélèvements concomitants d’ulcères du pied étaient disponibles pour les patients. Les résultats des cultures d’os et d’écouvillons étaient identiques pour% des patients, et les bactéries osseuses étaient isolées de la culture d’écouvillon correspondante chez% des patients La concordance entre les résultats des cultures de La concordance globale pour tous les isolats était de% Aucun événement indésirable – comme une aggravation de la maladie vasculaire périphérique, une fracture ou une infection osseuse induite par biopsie Conclusions: Ces résultats suggèrent que les cultures superficielles par écouvillonnage ne permettent pas d’identifier de manière fiable les bactéries osseuses. La biopsie osseuse percutanée semble être sans danger pour les patients souffrant d’ostéomyélite diabétique du pied.

L’éradication prolongée de l’ostéomyélite chronique est difficile à atteindre pour plusieurs raisons, y compris les faibles niveaux de la plupart des agents antibiotiques dans les os chroniquement infectés; la diminution du métabolisme des agents pathogènes, qui sont habituellement incorporés dans un biofilm glycocalix relativement imperméable; et les caractéristiques particulières de l’environnement osseux en ce qui concerne le pH, la pression partielle d’oxygène et les concentrations protéiques es caractéristiques, qui nuisent à l’efficacité de la plupart des antibiotiques, ont généralement amené les médecins à considérer qu’une approche non chirurgicale de l’ostéomyélite chronique être efficace Récemment, cependant, plusieurs auteurs ont rapporté des résultats satisfaisants pour les patients atteints d’ostéomyélite diabétique du pied traités par un traitement conservateur, principalement consistant en une antibiothérapie avec peu ou pas de chirurgie Les antibiotiques utilisés dans ces études étaient les fluoroquinolones, la rifampine et la clindamycine, qui ont atteint des concentrations élevées dans l’os et ont montré une activité contre les bactéries en phase de croissance stationnaire ompte tenu du potentiel élevé de ces agents pour sélectionner des mutants naturellement résistants parmi la population bactérienne initiale, un régime médicamenteux combiné est fortement recommandé avec la rifampine. composants actifs à nouveau st pathogènes Cet aspect de la prise en charge de l’infection est préoccupant compte tenu de la propagation mondiale actuelle de la résistance bactérienne et de la diminution de la production de nouveaux agents antimicrobiens éfinition de ce qui constitue une documentation microbiologique fiable de l’ostéomyélite diabétique du pied est encore controversée arce que les cultures de plaies peuvent être contaminées par la flore colonisatrice, un échantillon de biopsie osseuse percutanée obtenu sans traversée d’une plaie ouverte est considéré comme la méthode de référence pour l’antibiothérapie Cependant, la biopsie osseuse est rarement réalisée. la pratique de routine en raison de la dépense impliquée et les événements indésirables possibles, et il est généralement remplacé par des cultures de prélèvements d’ulcère ou par des échantillons profonds prélevés lors d’interventions chirurgicales, telles que l’amputation ou le débridement des lésions du pied. les cultures d’ulcères avec des échantillons de biopsies osseuses sous-jacentes fiables pour les patients diabétiques Dans cette étude, nous rapportons les résultats d’une analyse observationnelle rétrospective transversale de patients atteints de diabète avec des épisodes confirmés d’ostéomyélite du pied ayant fait l’objet de cultures d’échantillons osseux. L’objectif principal était d’établir dans quelle mesure les résultats microbiologiques des prélèvements sur écouvillon étaient concordantes avec celles de l’étalon-or diagnostique, c’est-à-dire des cultures d’échantillons osseux percutanés

Patients et méthodes

Population Les dossiers médicaux ont été examinés chez des patients suspects d’ostéomyélite du pied qui fréquentaient notre clinique pour diabétiques, établie dans un hôpital général à Dron Hospital, Tourcoing, France. Ces patients avaient subi une biopsie percutanée chirurgicale mais n’avaient pas reçu d’antibiothérapie locale ou systémique pendant au moins plusieurs semaines avant la biopsie L’ostéomyélite du pied était fortement suspectée si au moins des critères cliniques suivants étaient présents: ulcère de la plaie pendant ⩾ semaines, saillie osseuse sous-jacente et ulcère avec une surface spécifique> cm ou une profondeur & gt; mm; et si la présence de tels critères était associée à un sondage osseux et / ou à d’autres résultats anormaux compatibles avec le diagnostic d’ostéite à l’imagerie radiographique radiographie simple, tomodensitométrie ou résonance magnétique nucléaire ou au gallium couplé [Ga-citrate] -technetium Radionucléide [mTc-diphosphonate] ou leucoscan [scintigraphie au Sulesomab utilisant un fragment Fab ‘d’anticorps antigranulocyte marqué au mTc; Immunomedics GmbH] Les données collectées prospectivement ont été analysées rétrospectivement: âge, sexe, détails et durée du diabète, taux d’hémoglobine glyquée, présence d’une maladie vasculaire périphérique, durée de l’ulcère, classification de Wagner et utilisation d’antibiotiques avant consultation ou hospitalisation. l’état du pied a été évalué en fonction de la présence ou de l’absence d’impulsions dorsale-pédieuse et postérieure-tibiale; pression d’oxygène transcutanée a été mesurée pour les patients présentant une ischémie symptomatique du pied La biopsie osseuse percutanée était contre-indiquée lorsque la pression d’oxygène transcutanée était & lt; mm échantillons HgSpecimen échantillons ont été obtenus après un bref nettoyage de l’ulcère avec une solution de glucose physiologique stérile au moyen d’une compresse stérile passée sur la surface de l’ulcère pour réduire la quantité de bactéries contaminantes échantillons de tampon ont été obtenus au bas de l’ulcère Les cultures d’ulcère n’étaient incluses dans l’analyse que si elles avaient été obtenues quelques jours avant la biopsie osseuse. Tous les patients de l’étude ont subi des biopsies osseuses percutanées, réalisées dans la salle d’opération par un orthopédiste utilisant une aiguille de biopsie Becton Dickinson. Une incision cutanée d’au moins mm à partir de la périphérie de l’ulcère, pour éviter la contamination par la flore colonisatrice. Cette distance minimale a été réduite lorsque l’ostéomyélite a été diagnostiquée et l’os des orteils a été biopsiée. Des échantillons osseux percutanés ont été obtenus sous fluoroscopie. biopsies osseuses, un nouvel ensemble d’aiguilles a été utilisé pour chaque site de biopsie. La biopsie osseuse a été réalisée par voie dorsale Lorsque la sévérité de l’infection a nécessité un débridement, une biopsie osseuse percutanée a été réalisée avant l’ouverture du pied. Toutes les biopsies osseuses ont été réalisées avec des précautions stériles peropératoires et sous anesthésie locale ou générale. neuropathie entraînant une anesthésie superficielle et profonde, aucune anesthésie supplémentaire n’a été réalisée Deux fragments d’os ont été obtenus pour chaque biopsie; l’un a été inoculé dans le bouillon de Rosenow Biorad, et l’autre a été placé dans un système de transport standard Port-à-germe; Biomérieux Les deux fragments ont été immédiatement apportés au laboratoire de microbiologie, où des cultures aérobies et anaérobies ont été maintenues pendant des jours et des semaines respectivement. Évaluation microbiologique Les isolats bactériens ont été identifiés au niveau des espèces à l’aide de bandelettes API Biomérieux Chacune des souches cultivées à partir d’échantillons osseux et Des échantillons d’écouvillons ont été identifiés et évalués pour la sensibilité aux antibiotiques conformément au protocole institué dans notre clinique du pied diabétique pour l’échantillonnage des ulcères et des échantillons osseux de tous les patients atteints d’ostéomyélite diabétique du pied nalyse semi-quantitative du nombre d’unités formant colonies par culture au moyen d’un cadre de dénombrement pour cultures sur écouvillon et biopsie osseuse Les bactéries récupérées uniquement dans les milieux de bouillon étaient considérées comme des contaminants et n’étaient pas incluses dans l’analyse. Un microorganisme appartenant à la flore cutanée staphylocoques à coagulase négative et corynébactéries isolées dans des échantillons osseux était considéré comme être pathog enic seulement si la même souche selon le profil de susceptibilité avait été cultivée à partir du bouillon de Rosenow et du système de transport standard correspondant. Analyses statistiques Le test exact de Fisher a été utilisé pour comparer les résultats microbiologiques. Le niveau de signification statistique a été fixé à P & lt;

Résultats

Population Entre janvier et juin, un total de biopsies osseuses consécutives du pied ont été réalisées chez des patients dont les patients diabétiques consécutifs répondaient aux critères de l’étude Soixante-seize pour cent de ces patients avaient des zones ostéomyélitiques distinctes, pour un total d’épisodes de l’ostéomyélite avait un résultat positif en culture osseuse, et ces patients constituaient la population étudiée des patients restants, avaient une culture osseuse stérile, n’avaient reçu aucun traitement antibiotique avant la biopsie osseuse et n’avaient pas reçu de diagnostic d’ostéomyélite au même site à leur examen clinique et radiologique à la clinique du pied diabétique pendant une période d’au moins un an après la biopsie osseuse L’âge moyen ± écart-type des patients était de ± ans, et la durée moyenne du diabète ± écart-type était de ± ans; tous sauf les patients avaient un diabète sucré type, et le taux moyen d’hémoglobine glyquée ± SD pour tous les patients était de% ±%,% -% des lésions du pied,% étaient de grade III Wagner et les autres étaient de grade IV, avec gangrène comme Les biopsies osseuses ont été réalisées sur une tête métatarsienne dans les cas%, sur la phalange proximale en% et sur la phalange distale en% Onze patients% ont nécessité un débridement chirurgical Évaluation microbiologique La répartition des pathogènes identifiés dans les cultures d’échantillons osseux et de cultures d’écouvillons superficiels est indiquée dans le tableau. Les écouvillons ne peuvent pas être appliqués car la lésion du pied est sèche et les écouvillons ne sont pas concomitants avec la biopsie osseuse dans les autres cas. le nombre moyen d’isolats par écouvillon était de l’ordre de grandeur, – des isolats cultivés à partir d’échantillons sur écouvillon,% étaient des bactéries Gram positif aérobies,% étaient des bacilles à Gram négatif i et% étaient des anaérobies stricts. Dans tous les cas, des isolats ont été cultivés à partir d’échantillons de biopsie osseuse, soit le nombre moyen d’isolats par spécimen; gamme, -, y compris les bactéries gram-positives aérobies% d’isolats, bacilles gram-négatifs et anaérobies stricts% Globalement, les pathogènes étaient également représentés dans les cultures de spécimens osseux et d’écouvillons, sauf pour les staphylocoques% vs%, dans les échantillons osseux et des écouvillons, respectivement; P & lt; et staphylocoques à coagulase négative% vs%, dans les échantillons osseux et les écouvillons, respectivement; P & lt; Des souches de Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline ont été identifiées en% d’échantillons sur écouvillon et en% d’échantillons osseux

Tableau View largeTélécharger slideDistribution des pathogènes cultivés à partir d’écouvillons et d’échantillons de biopsie osseuse percutanée obtenus chez des patients diabétiques soupçonnés d’ostéomyélite du piedTable View largeTélécharger slideDistribution de pathogènes cultivés à partir d’écouvillons et d’échantillons de biopsie osseuse percutanée obtenus chez des patients diabétiques suspectés d’ostéomyélite. nombre d’unités formant des colonies a montré que la proportion de cultures résultant en un petit nombre d’unités formant des colonies était plus élevée pour les cultures de biopsie osseuse que pour les cultures d’échantillons sur écouvillon% vs%, respectivement; tableau Le pourcentage de cultures résultant en un petit nombre d’unités formant des colonies n’était pas significativement différent pour S aureus et les staphylocoques à coagulase négative lorsque les résultats ont été examinés séparément pour l’écouvillon et les cultures de biopsie osseuse% vs% et% vs%, respectivement; table

Tableau View largeTélécharger une analyse quantitative des cultures d’écouvillons et d’échantillons de biopsie osseuse chez des patients diabétiques suspectés d’ostéomyélite du piedTable View largeTélécharger une diapositiveAnalyse quantitative de cultures d’écouvillons et de biopsies osseuses chez des patients diabétiques suspectés d’ostéomyélite Les résultats des cultures d’échantillons concomitants d’un ulcère du pied étaient disponibles pour les épisodes d’ostéomyélite Des résultats strictement identiques pour les prélèvements de plaie et les cultures d’échantillons osseux ont été notés dans les cas%, y compris les cas d’infection due à S. aureus Dans tous ces cas, le profil de susceptibilité à la méthicilline de S aureus était concordant Les bactéries osseuses ont été cultivées en culture de l’écouvillon superficiel correspondant en% des cas. Une estimation de la concordance entre les résultats des échantillons sur écouvillon et des cultures de biopsie osseuse a été fournie par le pourcentage d’échantillons d’os et d’écouvillons dans le je Identification du même pathogène chez un patient donné Comme indiqué dans le tableau, cette concordance variait de% à%, avec une concordance globale de% Les meilleurs résultats ont été observés pour les souches de S aureus alors que les résultats les plus discordants étaient ceux des staphylocoques coagulase négative , entérocoques, corynébactéries et anaérobies

Tableau View largeTélécharger slideProportion d’agents pathogènes isolés de cultures de biopsie osseuse et / ou d’écouvillons prélevés chez des patients diabétiques suspectés d’ostéomyéliteTable View largeTélécharger diapositiveProportion d’agents pathogènes isolés de cultures de biopsie osseuse et / ou d’écouvillons prélevés chez des patients diabétiques suspects ostéomyéliteEffets indésirables Aucun événement indésirable dû à une biopsie osseuse, p. ex. aggravation d’une maladie vasculaire périphérique, fracture ou infection osseuse n’a été observé dans la population de patients Un patient a présenté un épisode aigu d’ostéoarthropathie de Charcot plusieurs semaines après la biopsie osseuse.

Discussion

À l’exception de l’épisode d’ostéoarthropathie aiguë de Charcot survenu le mois suivant la biopsie osseuse, aucun événement indésirable n’a été rapporté chez les patients présents. Cela peut être dû à une biopsie osseuse réalisée par voie percutanée dans des conditions satisfaisantes, car la plupart des Infections du pied En outre, les dépenses et les efforts, ainsi que le risque de propagation de l’infection à un os non infecté et la possibilité de fracture, sont généralement considérés comme des facteurs négatifs Dans la plupart des études décrivant des séries de patients avec ostéomyélite diabétique du pied, la documentation bactérienne n’est pas fiable, car elle est basée sur les résultats de cultures d’échantillons superficiels, et une biopsie osseuse n’est généralement pas pratiquée [ Lorsque les résultats d’une culture de biopsie osseuse sont rapportés, ils concernent généralement des échantillons de tissus profonds. n lors du débridement, plutôt que de véritables biopsies, et les patients étudiés constituent la majorité des séries sélectionnées pour l’étude et ne sont pas consécutifs Chez nos patients, l’absence de traitement antibiotique en cours au moment de la culture osseuse constitue un autre différence par rapport aux études précédentes, dans lesquelles l’intervalle sans antibiotique avant l’obtention des échantillons de culture n’est généralement pas mentionnée [,,] Des résultats faussement négatifs de la culture osseuse peuvent en effet résulter de la libération prolongée d’antibiotiques de l’os, comme Witso et al. ans un modèle in vitro Le respect d’une période prolongée sans antibiotique avant biopsie peut expliquer la forte proportion de résultats positifs en culture osseuse chez nos patients. Les pathogènes osseux ont été identifiés dans les cultures correspondantes d’échantillons superficiels sur écouvillon dans seulement% des cas, ce qui confirme la faible fiabilité des cultures d’échantillons sur écouvillon pour le diagnostic microbiologique de l’ostéomyélite du pied chez les diabétiques ckowiak et al nt établi que les cultures d’échantillons osseux constituent l’étalon-or pour le diagnostic microbiologique de l’ostéomyélite chronique dans une analyse rétrospective bien menée des cultures des sinus et des os d’une série de patients atteints d’ostéomyélite chronique; cette étude, cependant, n’incluait pas les infections du pied diabétique. Il existe des similitudes et des différences entre la présente étude et celle de Mackowiak et al le pathogène osseux a été isolé en% et en% des cultures de prélèvements superficiels dans chaque étude, alors que les concordances pour les agents pathogènes autres que S aureus étaient respectivement de% -% et% -% La concordance pour S aureus dans l’étude de Mackowiak et al était significativement différent de celui de notre étude, qui était beaucoup plus faible% La plus grande variabilité de la composition de la flore colonisatrice des plaies diabétiques du pied, comparée à la composition de la fistule chronique de l’ostéomyélite, peut expliquer cette discordance u meilleur de notre connaissance, aucune étude en cours impliquant des patients atteints d’ostéomyélite diabétique du pied n’a été conçue pour évaluer la concordance entre les cultures d’échantillons sur écouvillon superficiels et les échantillons de biopsie osseuse percutanée. Slater et al nt récemment rapporté que les échantillons superficiels Les échantillons de tissus prélevés lors du débridement chirurgical sont corrélés en% des cas avec atteinte osseuse. Dans leur étude, cependant, des prélèvements e pris peropératoirement via la lésion du pied infecté, ce qui peut avoir entraîné leur contamination par les bactéries de surface, et donc, dans la surestimation de la concordance entre les cultures d’échantillons de tissus profonds et superficielsBien que les biopsies osseuses percutanées analysées dans la présente étude aient été obtenues l’utilisation d’une aiguille de biopsie osseuse -gauge, plutôt que d’une biopsie chirurgicale ouverte, peut avoir signifié que la zone ostéomyélitique a été manquée, conduisant au sous-traitement des patients en raison de résultats faussement négatifs Une autre limite de la présente étude était l’absence de confirmation histologique concomitante de l’ostéomyélite, ce qui aurait pu faciliter l’interprétation des résultats microbiens, en particulier pour les staphylocoques coagulase-négatifs et les entérocoques. Notez que la découverte d’un salut La proportion d’isolats de staphylocoques à coagulase négative dans les échantillons de biopsie osseuse comparée aux échantillons sur écouvillon était indépendante des résultats de notre laboratoire de microbiologie qui a identifié tous les organismes cultivés à partir d’échantillons d’os et d’écouvillons, y compris des bactéries de la flore cutanée. le protocole établi dans notre clinique pour les pieds diabétiques e plus, des résultats comparables concernant la proportion élevée de staphylocoques à coagulase négative cultivés à partir d’échantillons osseux fiables pour les patients souffrant d’ostéomyélite diabétique du pied ont déjà été rapportés onclusions

Nos résultats confirment la faible fiabilité des cultures d’écouvillons superficiels prélevés chez des patients atteints d’ostéomyélite diabétique du pied pour l’identification des pathogènes osseux et la sécurité de la biopsie osseuse percutanée chirurgicale. Cependant, compte tenu de la difficulté d’organiser des biopsies osseuses percutanées chez les patients diabétiques ostéomyélitiques, Il est préférable de limiter ces biopsies aux centres diabétiques où des antibiotiques avec un potentiel de sélection de la résistance bactérienne, en particulier les fluoroquinolones et la rifampicine, sont prescrits régulièrement. Des études complémentaires sont nécessaires pour évaluer la concordance entre les résultats des cultures d’échantillons obtenus par curetage et curetage. échantillons obtenus à partir de biopsies osseuses percutanées

Remerciements

Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: pas de conflits