Candida dubliniensis dans un centre de cancérologie

Candida dubliniensis, une levure positive pour les tubes germinaux décrite et identifiée comme étant une cause de candidose buccale chez les patients atteints du syndrome d’immunodéficience acquise en Europe, a une distribution clinique et géographique en expansion qui semble similaire à celle de l’autre tube germinatif positif. levure, Candida albicans Cette étude a déterminé la fréquence, le spectre clinique, le profil de pharmacosensibilité et les méthodes d’identification de ce pathogène émergent dans un centre de cancérologie de et Vingt-deux isolats ont été récupérés chez des patients atteints de tumeurs malignes hématologiques ou d’immunodéficience acquise. Deux patients atteints d’un cancer avaient une infection invasive et étaient colonisés par un champignon ou avaient une infection fongique superficielle Tous les isolats produisaient des tubes germinatifs et des chlamydospores à ° C, ne poussaient pas en ° C et donnaient des réactions négatives avec le d-xylose et l’α-méthyl- d-glucoside dans les systèmes d’identification de levure API C AUX et ID C L’identification phénotypique a été confirmée par technologie de sonde de balise moléculaire Tous les isolats étaient sensibles aux médicaments antifongiques amphotéricine B, -fluorocytosine, fluconazole, itraconazole et kétoconazole

Auparavant, toutes les espèces de Candida positives au tube germinatif étaient identifiées comme étant Candida albicans. Une deuxième espèce de Candida positive, Candida dubliniensis, aurait colonisé la cavité buccale et provoqué une candidose buccale chez des patients séropositifs en Irlande. Des études rétrospectives ultérieures en Europe, ~% d’isolats de levure identifiés initialement comme étant des albicans C ont été identifiés comme C dubliniensis Depuis le rapport initial, C dubliniensis a été récupéré de patients provenant de diverses sources, y compris la cavité buccale. , urines, vagins, poumons, fèces et expectorations, chez des patients séropositifs et séronégatifs [, -] Récemment, des articles ont signalé des cas de fongémie C dubliniensis La plupart des isolats de C dubliniensis ont été sensibles in vitro à agents antifongiques utilisés Cependant, une résistance au fluconazole a été rapportée [,,], et une résistance stable au fluconazole peut être induite in vitro après l’exposition au médicament . Les méthodes otypiques et génotypiques pour l’identification des levures ont aidé à définir les différences entre C dubliniensis et C albicans et à établir des méthodes appropriées pour différencier les levures dans le laboratoire de microbiologie C dubliniensis ne semble pas se développer à ° C, alors que la plupart des C albicans En outre, une analyse des systèmes d’identification des levures a montré que C dubliniensis n’assimile généralement pas l’α-méthyl-d-glucoside, le tréhalose et le d-xylose, alors que le C albicans utilise généralement des méthodes moléculaires à base d’ADN. Pour déterminer la fréquence, le spectre clinique, les profils de sensibilité aux médicaments et les méthodes appropriées pour l’identification de ce pathogène émergent dans un centre de cancérologie, tous les cas où C dubliniensis a été identifié au Memorial Sloan-Kettering Cancer Center MSKCC, New York City, un centre de cancérologie en soins tertiaires, pendant et passé en revue

Patients et méthodes

Patients Les noms et les dossiers médicaux de tous les patients ayant au moins la culture positive pour C dubliniensis ont été obtenus à partir de MSKCC. Les dossiers médicaux de ces patients ont été résumés par l’utilisation d’une forme normalisée d’extraction de données. Les patients ne présentaient pas d’infection invasive lorsque C dubliniensis était isolé dans une culture en l’absence de tout symptôme clinique ou de signe de colonisation de l’infection ou d’une infection tissulaire et d’un échantillon de culture ou de biopsie du site de C dubliniensis. L’exposition à des médicaments antifongiques comprenait l’administration de fluconazole, d’itraconazole, d’amphotéricine B, y compris des formes associées aux lipides, des pastilles de clotrimazole, ou de -fluorocytosine chez des patients traités par antifongique. les mois précédant l’isolement de C dublinie La durée du cancer ou de l’infection par le VIH a été marquée depuis le diagnostic de la maladie primaire sous-jacente jusqu’au moment de l’isolement de C dubliniensis. La durée du suivi a été marquée depuis l’isolement de C dubliniensis jusqu’au dernier suivi. De janvier à janvier, ou au moment du décès ou de la perte de suivi Pour l’évaluation des résultats, le décès a été défini comme un décès au cours de l’hospitalisation au cours de laquelle C dubliniensis a été identifié ou mort quelques jours après l’isolement initial des isolats de C dubliniensis. la prévalence et l’incidence de C dubliniensis au MSKCC dans des isolats choisis au hasard de levures tubulaires positives ont été identifiées prospectivement par les méthodes microbiologiques phénotypiques décrites ci-dessous. En outre, des levures positives au tube germinal isolées à partir de sites stériles précédemment identifiés comme C albicans ont été examinées rétrospectivement Finalement, à partir du mois d’avril, toutes les levures positives pour les tubes germinaux ont été identifiées comme étant soit C albica ns ou C dubliniensis Tests d’identification phénotypique Tests d’identification présomptive de la levure incluant la formation de germes à ° C dans le sérum de cheval Life Technologies, production de chlamydospores sur gélose au polysorbate Becton Dickinson, croissance à ° C sur agar Sabouraud dextrose Becton Dickinson et réactivité du substrat profils obtenus avec les systèmes API C AUX et ID C tests d’identification bioMérieux VitekGenotypic Un panel d’isolats cliniques de C albicans et C dubliniensis a été préparé au MSKCC et envoyé pour évaluation moléculaire en aveugle à l’Institut de Recherche en Santé Publique, New York. Évaluation moléculaire du ribosome La région ITS de la levure a été utilisée pour vérifier de manière indépendante l’identification des espèces obtenues par caractérisation phénotypique Après amplification par PCR de la région ITS de la levure, des informations sur la séquence d’ADN spécifique de l’espèce ont été évaluées. ] Test de susceptibilité antifongique med. au laboratoire de mycologie de l’État de New York selon le Comité national pour les étalons de laboratoire clinique protocole de microdilution de bouillon MA Candida krusei ATCC et Candida parapsilosis ATCC ont été utilisés comme souches de contrôle de qualité Amphotericin B et -fluorocytosine ont été achetés commercialement Sigma Chemical Fluconazole, kétoconazole Des solutions médicamenteuses de stock ont ​​été faites dans du diméthylsulfoxyde ou de l’eau stérile RPMI contenant du tampon MOPS morpholinepropanesulfonique et sans bicarbonate de sodium comme diluant de médicament pour la préparation de plaques de microtitrage de stock, Les isolats pour les tests de sensibilité ont été cultivés en série deux fois pendant la nuit sur des plaques de gélose Sabouraud dextrose modifiée à température ambiante, et l’inoculum a été normalisé par spectrophotométrie. Le microtitrage p a été stocké à – ° CC des isolats de dubliniensis. On a fait une incubation à ° C de la dilution du médicament et de l’inoculum par puits, et on a examiné visuellement la présence ou l’absence de croissance. La CMI de l’amphotéricine B a été fixée à la concentration de médicament qui inhibait complètement la croissance des levures. pour les autres médicaments a été fixé à la concentration la plus faible% MIC, ce qui a provoqué une inhibition apparente de la croissance de la levure par rapport au puits de contrôle de la croissance

Résultats

Isolats de levures Dans les périodes d’étude et les approches,% des levures germinales positives ont été identifiées comme C dubliniensisPatients Vingt-deux isolats de patients ont été identifiés Tableau L’âge médian des patients était des années, et les patients étaient des hommes Sept patients avaient des tumeurs malignes Le temps médian entre le diagnostic du cancer et l’isolement de C dubliniensis était de ~ ans Le temps médian entre le l’isolement de C dubliniensis était de ~ ans Chez les patients, le muguet causé par C dubliniensis était présent au moment du diagnostic de l’infection par le VIH

Tableau View largeTélécharger slideCaractéristiques des patients atteints de Candida dubliniensis traités au Memorial Sloan-Kettering Cancer CenterTable View largeTélécharger slideCaractéristiques des patients atteints de Candida dubliniensis qui ont été traités au Memorial Sloan-Kettering Cancer CenterDeux patients avaient une infection invasive à C dubliniensis, et les patients pensaient Les patients atteints d’une maladie invasive ont eu un cancer. Le premier patient était une fille âgée de 16 ans avec un neuroblastome surrénalien métastasé au foie. Elle a été admise avec de la fièvre et une chimiothérapie. neutropénie induite Deux jours après l’admission, elle est devenue septique et a été transférée à l’unité de soins intensifs C dubliniensis a été récupéré à partir de séries d’hémocultures Le patient a été traité avec succès par l’amphotéricine B associée aux lipides B La deuxième patiente était une femme âgée de myélome multiple réfractaire qui L’arthrocentèse n’a pas montré de cellules malignes et a démontré la présence d’arthrite inflammatoire Les cultures de liquide synovial étaient positives pour C dubliniensis Le patient a été traité avec de l’amphotéricine B associée aux lipides. Elle est morte des semaines plus tard de sepsisPivot% des patients mort, y compris le patient avec une maladie invasive Aucun de ces décès ne semble provenir d’une infection à C dubliniensis, bien que l’autopsie n’ait été pratiquée que chez des patients douleurs articulaires. Identification phénotypique Tous les isolats de C dubliniensis produisent des tubes germinatifs et des chlamydospores à ° C, ne poussent pas en ° C, ont donné des profils d’assimilation avec les systèmes API C AUX et ID C, y compris des réactions négatives pour le d-xylose et l’α-méthyl-d-glucoside, ce qui suggère une identification gémotypique. confirmé toutes les souches de C dubliniensis identifiées par phénotype chez s étudeTests de susceptibilité antifongique Tous les isolats de C dubliniensis étaient sensibles aux médicaments antifongiques amphotéricine B CMI, – μg / mL, – CMI à la fluorocytose, <μg / mL, CMI au fluconazole, - μg / mL, MIC à l'itraconazole, <- μg / mL et MIC de kétoconazole, <- μg / mL

Discussion

C dubliniensis semble être une composante mineure de la flore buccale normale de l’homme Moins de% des levures à tube positif dans les collections de culture ou des cavités buccales d’individus sains ont été identifiés comme C dubliniensis Cependant, comme avec d’autres levures, L’immunosuppression et l’utilisation d’antimicrobiens permettent à C dubliniensis d’augmenter en nombre et éventuellement de provoquer une candidose buccale Environ% de patients infectés par le VIH peuvent être colonisés par la levure, et C dubliniensis a été isolée de la cavité buccale de ~% des patients atteints du SIDA et candidose buccale C dubliniensis était impliquée en tant qu’agent pathogène dans l’érythème gingival linéaire chez un enfant infecté par le VIH Bien que plusieurs rapports indépendants aient décrit la récupération de C dubliniensis chez des patients infectés par le VIH et chez Récemment, une maladie invasive a été signalée chez C. dubliniensis, une cause de fongémie chez les receveurs de greffe de moelle osseuse. et chez les patients présentant une neutropénie induite par la chimiothérapie Dans l’année, des cas de C dubliniensis ont été rapportés; les patients avaient une maladie hépatique au stade terminal, le patient avait une leucémie lymphocytaire chronique et le patient était séropositif tableau

Diapositive de cas d’infection invasive causée par Candida dubliniensisTable View largeTélécharger la diapositiveRécapitulation des cas d’infection invasive causée par Candida dubliniensisDans la présente étude, ~% des cas d’infection par la levure tube-positif ont été identifiés comme étant causés par C dubliniensis, bien que cette étude n’était pas exclusivement prospective Seize patients dont la levure était isolée présentaient des hémopathies malignes, des tumeurs solides ou du SIDA. L’organisme était isolé non seulement des sécrétions buccales mais aussi du sang, de la bile, du liquide synovial, des expectorations bronchiques. liquides de lavage, urine, selles et abcès Quatorze patients ont été colonisés par la levure ou ont eu une infection fongique superficielle Deux patients avaient une infection fongique invasive, ce qui a permis de porter le nombre de cas déclarés de maladie invasive La majorité des isolats de C dubliniensis ont été sensibles in vitro aux antifongiques couramment utilisés. Dans une étude,% des isolats oraux récupérés chez des patients atteints du SIDA et exposés au fluconazole étaient résistants au fluconazole . Dans la même étude, il a également été démontré que le fluconazole a provoqué une augmentation de la sensibilité au fluconazole. montré que C dubliniensis peut développer une résistance au fluconazole après une exposition directe au médicament in vitro L’exposition séquentielle d’isolats cliniques sensibles au fluconazole à des concentrations croissantes de fluconazole dans un milieu gélosé a entraîné la récupération de levures exprimant un phénotype stable résistant au fluconazole. Dans la présente étude, tous les isolats étaient sensibles à tous les antifongiques testés, y compris le fluconazole, même les isolats de patients qui avaient été exposés à des antibiotiques de la famille des C. albicans (MDR, CDR et CDR). fluconazoleThus, C dubliniensis est un pathogène fongique opportuniste émergent qui peut causer i Il semble que le spectre clinique de C dubliniensis ressemble à celui de C. albicans Cependant, la suggestion in vitro que C dubliniensis pourrait être capable de développer une résistance à l’azole devrait conduire à une intensification de la maladie. efforts pour rechercher cette levure positive au tube germinatif Des études futures détermineront si ce pathogène deviendra une cause importante de maladie chez les patients immunodéprimés